首先人员上的规定：各级扩培人员的无菌意识要高度一致，在实验室阶段，一定严格按照无菌操作规程进行；生产现场扩培人员上岗前要换好指定工作服，扩培操作前要用75%酒精擦拭双手，避免发生交叉污染。
其次，对环境要求也非常严格：无种室应按要求定期消毒，紫外线照射至少30min，实验仪器应随时在0.1MPa之下消毒20-30min；接种和添加麦汁过程之中的所有管道和阀门必须用热水或蒸汽完全消毒。室内地面和墙面也应定期喷洒一定浓度的消毒剂进行消毒灭菌。室内空气在接种前一天应完全消毒，接种后应进行二次消毒。
然后是扩培麦汁的要求：种子罐之前的麦汁尽量取头号麦汁，加水调节浓度为11～120P ，灭菌要求0.1MPa，20～30min；也可经过特殊处理后，进行干热灭菌，要求120℃恒温3h；现场扩培用麦汁为沉淀槽中的热麦汁，浓度在120P左右，α-氨基氮应在180～220mg/L，可添加适量的酵母营养盐。麦汁灭菌方法同前。
最后是压缩空气：用于通风和供氧的压缩空气，必须经过三级膜过滤后才能使用。同时，氧气含量要适当，酵母在氧气不足的情况下生长缓慢，而氧气过多会造成酵母细胞呼吸酶活性过强，酵母繁殖过多不利于后期发酵。一般来说，在进入培养罐之前，膨胀的培养酵母应该每天充气三次，每次20-30分钟。
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